[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 10، شماره 1 - ( بهار 1391 ) ::
جلد 10 شماره 1 صفحات 10-16 برگشت به فهرست نسخه ها
طراحی آزمون زنجیرهای پلی مراز (PCR) جهت تشخیص مولکولی سریع Neisseria meningitidis
زکیه قدیمی، محمد سلیمانی، امیر حسین محسنی، کیوان مجیدزاده
ایران، تهران، دانشگاه علوم پزشکی آجا، مرکز تحقیقات زیست فناوری تسنیم (نویسنده مسئول) ، k-majidZadeh@armyums.ac.ir
چکیده:   (9197 مشاهده)

  سابقه و هدف: نایسریا مننژیتیدیس پاتوژن اختصاصی انسان و دومین عامل شایع مننژیت در جهان است. جهت شناسایی این باکتری از آزمون ‌ های سنتی مانند کشت مایع نخاعی استفاده می ‌ شود ولی از معایب این روش ‌ ها وقت گیر بودن است. هدف این مطالعه، تشخیص سریع این باکتری به روش واکنش زنجیره ‌ ای پلی مراز (PCR) با استفاده از ژن CrgA است.

  مواد و روش ها: ژن اختصاصی، حفاظت شده و دارای ارزش تشخیصی CrgA جهت طراحی پرایمر انتخاب گردید. پرایمرهای اختصاصی برای این ژن طراحی شد. واکنش PCR توسط این پرایمرها بر روی DNA ژنومیک نایسریا مننژیتیدیس راه اندازی شد. جهت ساخت کنترل مثبت، محصول PCR در وکتور pTZ57R/T کلون گردید. جهت تایید حضور ژن هدف در وکتور، روش هضم آنزیمی و توالی یابی انجام شد. به منظور تعیین حساسیت واکنش، از پلاسمید کنترل مثبت فوق با غلظت اولیه 70 نانوگرم رقت 5-10- 1-10 تهیه گردید و واکنش PCR ژن هدف بر روی همه رقت ‌ های پلاسمید انجام گرفت. تعیین ویژگی واکنش، بر روی 11 ژنوم از باکتری ‌ های مختلف انجام شد.

  یافته ها: نتایج PCR ژن CrgA باند مورد انتظار 500 جفت باز را نشان داد. نتایج حاصل از هضم آنزیمی و توالی یابی، حضور ژن هدف را در وکتور تایید کرد. حد نهایی تشخیص این روش برای ژن Crg A ، 70 پیکوگرم به دست آمد. نتایج تعیین ویژگی مشخص نمود که پرایمر طراحی شده با هیچ یک از باکتری ‌ های دیگر واکنش تکثیر غیر اختصاصی ندارد.

  بحث و نتیجه گیری: روش PCR طراحی شده در این تحقیق از دقت و حساسیت لازم برخوردار است به طوری که از این روش می ‌ توان به عنوان یک آزمون قابل اعتماد، جهت تشخیص سریع باکتری نایسریا مننژیتیدیس استفاده نمود.

واژه‌های کلیدی: نایسریا مننژیتیدیس، واکنش زنجیره ‌ ای پلیمراز، تشخیص سریع مولکولی
متن کامل [PDF 1123 kb]   (4581 دریافت)    
نوع مطالعه: اصیل (پژوهشي) | موضوع مقاله: عمومى
دریافت: ۱۳۹۱/۱/۱۷
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Ghadimi Z, Soleimani M, Mohseni A, Majidzadeh-A K. Design of a PCR method for rapid detection of Neisseria Meningitidis bacterium. Ann Mil Health Sci Res. 2012; 10 (1) :10-16
URL: http://journals.ajaums.ac.ir/article-1-794-fa.html

قدیمی زکیه، سلیمانی محمد، محسنی امیر حسین، مجیدزاده کیوان. طراحی آزمون زنجیرهای پلی مراز (PCR) جهت تشخیص مولکولی سریع Neisseria meningitidis. سالنامه پژوهش علوم سلامت و نظامی. 1391; 10 (1) :10-16

URL: http://journals.ajaums.ac.ir/article-1-794-fa.html



دوره 10، شماره 1 - ( بهار 1391 ) برگشت به فهرست نسخه ها
سالنامه پژوهش علوم سلامت و نظامی Ann Mil Health Sci Res
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 30 queries by YEKTAWEB 3764